知识·巧学
一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
基因工程的“分子手术刀”指的是DNA限制性核酸内切酶(以下简称限制酶)。限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定部分的两个核苷酸之间“切割”DNA分子。例如,从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列,并在G和A之间将这段序列切开。目前已经发现了二百多种限制酶,它们的切点各不相同。苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因就能被某种限制酶切割下来。
疑点突破
限制性内切酶识别序列和切开部位有何特点?
限制酶所识别的序列,大多数是由6个核苷酸组成,也有少数识别序列由4、5或8个核苷酸组成,但都可以找到一条中轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的;任何一种限制酶因其本身性质所决定,都只识别和切断特定的核苷酸序列,而不是在任何部位都能将DNA切开。
要点提示 当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA两条链分别切开时,产生的是黏性末端;在中轴线处切开时,产生的是平末端。