知识•巧学
一、筛选菌株
1.PCR技术是一种在体外将少量DNA大量复制的技术,PCR技术的原理是:如果DNA片段两端的序列是已知的,那么采用PCR就可以很容易地将此DNA片段从整个DNA分子中扩增出来。进行PCR需要一段寡聚核苷酸链作为引物,它们各自与要扩增的靶DNA片段末端互补,引物与模板DNA相结合并沿模板DNA延伸,以扩增靶DNA序列。PCR技术需要使用耐高温的DNA聚合酶,这种酶要能够忍受93 ℃左右的高温。
深化升华 PCR的过程由三个基本反应组成:(热)变性、复性、延伸,这样构成一个循环的复制,新合成的DNA链又可以作为模板进行下一轮复制,重复3步操作。DNA片段呈2的指数增长,在1~2小时内可完成25~30次的循环,扩增的DNA片段数可增至106~107倍。
2.选择培养基是指允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
二、统计菌落数目
1.直接计数法
这种方法是指利用特定的细菌计数板或者血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积样品中微生物的数量。计数板是一块特制的载玻片,上面有一个面积为1 mm2和高0.1 mm的计数室,该计数室又均分成400个小格。测量时将稀释的样品滴加在计数板上,盖上盖玻片,然后在显微镜下数出每个小格所含的细菌的平均数,再按下面的公式求出每毫升样品所含的细菌数。