1.获得目的基因
(1)目的基因:人们所需要的基因。如:人的胰岛素基因、植物的抗病基因等。
(2)获取方法
①如果目的基因的序列是已知的,可用化学方法合成目的基因,或者用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因。
②如果目的基因的核苷酸序列是未知的,可以从基因文库中获取。
2.形成重组DNA分子
通常是用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA(如质粒),使其产生相同的粘性末端,然后用DNA连接酶将两者连接在一起,形成重组DNA分子。
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