1.无菌操作技术
实验室常利用高温处理达到灭菌效果,包括采用干热灭菌或湿热灭菌等方法。
(1)干热灭菌方法是将准备灭菌的物品放在干热灭菌箱内,在160~170 ℃下加热1~2 h以达到灭菌的目的。
(2)湿热灭菌方法常采用高压蒸汽灭菌锅进行,如手提式高压蒸汽灭菌锅就是实验室常用的灭菌仪器之一。高压蒸汽灭菌锅的使用包括加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等步骤。
2.配制培养基
(1)培养基的概念:为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。
(2)培养基的类型
①天然培养基
含义:是指采用动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成的培养基。
优点:取材便利、营养丰富、配制简便。
缺点:营养成分难以控制、实验结果的重复性较差。
②合成培养基
含义:是指由准确称量的分析纯等级别的高纯度化学试剂加蒸馏水配制而成的培养基。
优点:化学成分及其含量明确、实验的可重复性好。
缺点:配制繁琐、成本较高。
(3)培养基的成分:各种培养基的配方虽然不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的物质。
(4)配制培养基时,常常要在液体培养基中加入一定量的凝固剂。琼脂是常用的凝固剂之一。