1.理论基础——植物细胞的全能性
(1)含义:植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性,因而都具有发育成完整植株的潜能。
(2)特点
①不同种类植物或同种植物的不同基因型个体的细胞全能性的表达程度大不相同。
②长期培养中,培养物的胚胎发生和器官形成能力下降。
2.程序
(1)半固体培养基的配制:培养基中含有适当营养物质、植物生长调节剂及0.7%~1%的琼脂;把培养基倒入灭菌试管中凝固成半固体。
(2)小组织块的切取:从消毒的根、茎、叶上切取。
(3)愈伤组织的获得:植物组织块切口处的细胞在创伤的刺激下发生脱分化,成为分裂的细胞。在创伤表面形成一种由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织,即为愈伤组织。
(4)新植株的再生
①诱导愈伤组织,使其产生出芽和根的顶端分生组织,并由此再生出新的植株。
②将愈伤组织分散成单个细胞,再在适宜培养基上培养发育成胚状体,进而发育成新的植株。
3.成功的条件
(1)深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件。
(2)在植物克隆试验研究中,尽量选择性状优良、细胞全能性表达充分的基因型。