1.下列有关PCR的描述,不正确的是( )
A.PCR的技术原理是DNA复制
B.是一种酶促反应,需耐高温的解旋酶和DNA聚合酶
C.一个DNA片段经PCR扩增,可形成2n个DNA片段(n代表循环的次数)
D.PCR技术利用DNA的热变性来控制DNA的解聚与结合
B [PCR技术是利用热变性原理让模板DNA分子解旋的而不是通过解旋酶的作用。]
2.PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,从而被广泛应用,此过程需要TaqDNA聚合酶。请回答有关问题:
(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用___。
(2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。
①为什么在热泉中只筛选出来Taq细菌呢?
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_________________________________________________________________
________________________________________________________________。
②TaqDNA聚合酶的功能是________________________________________。
③TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用________________法和________________法进行分离。
(3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在________中才能进行,并且要严格控制________条件。
(4)PCR中加入的引物有________种,加入引物的作用是________________。
[解析] (1)PCR技术中用高温使DNA分子中的氢键打开,从而解旋。(2)①利用细菌特有的特性而与其他细菌区分开来,Taq细菌具有耐高温的特性,放在高温环境下,其他绝大多数细菌死亡,而Taq细菌得以保留。②在DNA分子复制中,TaqDNA聚合酶将一个脱氧核苷酸的脱氧核糖和另一脱氧核苷酸的磷酸连接形成磷酸二酯键。③蛋白质的分离可以根据其分子大小和带电的性质和多少使之分离,即凝胶色谱法和电泳法。(3)PCR反应是在一定的缓冲溶液中进行的,并需严格控制好温度条件。(4)PCR与体内DNA复制过程中的原料是完全相同的,并加入小段单链DNA或RNA作为引物,引导DNA复制,可以使游离的脱氧核苷酸与之结合形成磷酸二酯键,成为DNA复制的起点。
[答案] (1)高温使DNA分子热变性 (2)①热泉70 ℃~80 ℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物
②催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键
③凝胶色谱 电泳 (3)一定的缓冲溶液 温度
(4)2 作为DNA复制的起点